技術文章
TECHNICAL ARTICLESELISA試劑盒的應按規則力求準確在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應,即加標本和加酶結合物后。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在試劑盒中似不恰當。ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會,只有z貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的...
ELISA試劑盒即酶聯免疫吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏,特異性強不需要特殊設備,所以被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術要求,在臨床檢驗中除正常反應外,有時常可見到一些錯誤結果(即假陽性或假陰性);在此為大家解讀下ELISA試劑盒檢測受影響因素中標本的影響。溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌...
ELISA試劑盒途徑的選擇決定于抗原的生物學特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學活性抗原,通常不宜選用靜脈打針。不一樣個別對共同抗原的反應性不一樣,而且不一樣抗原發作免疫反應的能力也有強有弱,因此常常在打針抗原的一起,參與能增強抗原的抗原性物質,以影響機體發作較強的免疫反應,這種物質稱為免疫佐劑。免疫前取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需求量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴參與等容積抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加...
ELISA試劑盒因此含雜質較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯絡的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的效果于。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附功能。例如,在檢查抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯絡。換言之,包被就是抗原或抗體聯絡到固相載體表面的進程。當抗原決定簇...
ELISA試劑盒是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。免疫酶技術是將酶標記在抗體/抗原分子上,形成酶標抗體/酶標抗原,稱為酶結合物。該酶結合物的酶在免疫反應后,作用于底物使之呈色,根據顏色的有無和深淺,定位或定量抗原/抗體。ELISA試劑盒是免疫酶技術的一種,其特點是利用聚苯乙烯微量反應板(或球)吸附抗原/抗體,使之固相化,免疫反應和酶促反應都在其中進行。在每次反應后都要反復洗滌,這既保證了反應的定量關系,也避...
目前市場上的ELISA試劑盒質量參差不齊,如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,具體有以下幾點可供參考:一、特異性ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關鍵組分,抗體對有關,若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。二、靈敏度靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質的量的能力,用戶可根據自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標量很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復性科學實驗講求重復性,一般ELISA試劑盒,其板內和板間變異系...
雞磷(P)ELISA試劑盒操作說明雞磷(P)ELISA試劑盒實驗原理雞磷(P)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被雞磷(P)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞磷(P)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清:將收集于血清分離管...
大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒實驗原理大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠1,4,5-三磷酸肌醇(...